MALANG - kali ini kita akan membahas tentang inisiasi replikasi. Inisiasi terjadi ketika terikatnya RNA polimerase pada rantai DNA (promoter), RNA polimerase akan memisahkan rantai ganda DNA dan mempersiapkan cetakan untaian tunggal agar bisa di transkripsi. Inisiasi terjadi di daerah yang disebut Origin of Replications yang disingkat dengan ORI. Lalu bagaimana dengan replikasi? Replikasi dapat dilakukan dengan memisahkan untai ganda heliks DNA dan sintesis dari sepasang untai komplementer. 

Sekitar tahun 1960, John Cairns mengembangkan Autoradiografi yang  terbukti bisa mempelajari tentang fenomena replikasi. Cara kerja teknik ini dengan menyebarkan bakteri yang dilisiskan (peristiwa pecah atau rusaknya integritas membran sel dan menyebabkan keluarnya organel sel) dengan lembut pada sebuah permukaan dengan tujuan penelitian. Lalu, sel bakteri akan ditumbuhkan pada media yang mengandung 3H-thymidine sebelum mempersiapkan kromosom. Penggunaan metabolik 3H-thymidine sering digunakan untuk memantau tingkat sintesis DNA atau proliferasi sel. Sel-sel yang sudah siap akan diamati dengan mikroskop cahaya supaya bisa melihat garis di untai DNA yang berlabel. Nah, dari pengamatan itu kalian bisa melihat bagaimana sifat melingkar dari kromosom bakteri bersama dengan pola keseluruhan ketika replikasi terjadi, pola itu bisa kalian sebut dengan theta (Ɵ). Masing-masing struktur yang ada di theta memiliki tiga panjang DNA yang berbeda-beda. Itu bisa terbentuk karena bagian kromosom yang tidak direplikasi dan sepasang anak molekul sedang dalam proses pembentukan. 

Replikasi dimulai di situs spesifik dalam kromosom yang bisa kalian sebut sebagai origin atau asal. Jadi, asal dari replikasi dimulai pada E. coli atau OriC, mereka memiliki 245 pasangan basa yang mengikat banyak protein untuk memulai proses. Panjang DNA yang direplikasi setelah melewati tahap inisiasi pada origin tunggal disebut replicon. Selain itu, replikasi dapat terjadi searah atau dua arah (unidirectional or bidirectional). Jika dua arah, garpu/cabang replikasi akan bermigrasi ke arah yang berlawanan dengan titik asal. Jadi, hanya akan ada satu replikasi pada bakteri dan bakteriofage, yaitu mereka memiliki satu replicon. Hasil autoradiografi menunjukkan mode replikasi dua arah mulai dari Oric dan ter (wilayah terminasi).

Sumber: Molecular biology:different facets (Anjali Priyadarshini)